SS-56, nowy komórkowy cel odpowiedzi autoprzeciwciał w zespole Sjögrena i układowym toczniu rumieniowatym ad 7

Sugeruje to, że kontrolowana replikacja wirusa po leczeniu lekami przeciwretrowirusowymi może zmniejszyć aktywację immunologiczną i występowanie przeciwciał u pacjentów z HIV-1. Figura 7AutoAb oznacza przeciw rSS-56 w surowicach pacjentów HIV-1 przebadanych przed i po HAART. Surowice od 32 pacjentów z HIV-1, zebranych w dwóch różnych okresach przed i po HAART, oraz od 32 zdrowych osób z grupy kontrolnej, analizowano pod kątem poziomów autoAb do rSS-56 za pomocą testu ELISA. Przedstawione wartości absorbancji uzyskano przy rozcieńczeniu 1: 300, a poziome słupki wskazują średnie. Omówienie Kompleksy RNP związane z Ro / SS-A są złożone z małych cytoplazmatycznych YRNA z co najmniej SSA-60 i białek SSB-48 (33). Oddziaływanie SSA-52 z cząstką Ro RNP jest jednak mniej jasne. Niedawno, pp75, fosfoproteina, o której doniesiono, że wiąże się z białkiem SSA-60 i autoAbPs do pp75, wykryto w SS i surowicach tocznia (22). W niniejszym badaniu zidentyfikowaliśmy SS-56, nowe białko, które dzieli homologię z innymi białkami niosącymi domeny palców RING, w tym SSA-52, ludzkie białko palca z retuszem (34) i staf 50 (35). Obecność palców RING, B box i cewek w wielu z tych białek powiązano ze zdolnością do wiązania DNA, wiązania RNA lub pośredniczenia w oddziaływaniach białko-białko (36). Chociaż SS-56 zawiera wszystkie trzy domeny, nasza próba wykazania aktywności wiązania DNA rekombinowanego białka zakończyła się niepowodzeniem. Może to odzwierciedlać fakt, że istnieje prawdziwy brak SS-56 do wiązania DNA lub, że białko wyrażane bakteryjnie jest nieprawidłowo fałdowane po solubilizacji w 8 M moczniku, co wcześniej obserwowano dla rekombinowanego SSA-52 wytwarzanego w E. coli (14). Z drugiej strony, ekspresja SSA-52 w systemie bakulowirusowym, która pozwala na odpowiednie modyfikacje posttranslacyjne, może skutkować białkiem o zdolności wiązania DNA (14, 15). Ten problem jest obecnie omawiany w naszym laboratorium. Ponadto, pytanie, czy SS-56 wiąże się z małymi RNA, może być badane, gdy będą dostępne przeciwciała immunoprecypitujące. Niemniej jednak, ze względu na brak motywu rozpoznawania RNA w SS-56 wydaje się mało prawdopodobne, aby to białko mogło wykazywać aktywność wiązania RNA. Stwierdzono, że tylko SSA-60 i SSB-48, ale nie SSA-52, mają motyw rozpoznawania RNA 80-aa i wiążą się z hYRNA (3). Chociaż komórkowa lokalizacja białek SSA i SSB była kontrowersyjna, obecnie istnieją silne dowody na to, że SSA-60 i SSB-48 znajdują się głównie w jądrze, podczas gdy większość SSA-52 znajduje się w cytoplazmie (11). Niemniej jednak, stosując mAb anty-SSA-52, Schmitz i in. donieśli o jądrowej lub jądrowej i cytoplazmatycznej lokalizacji białka w różnych typach komórek (37). W niniejszej pracy analiza za pomocą immunofluorescencji wykazała, że nowe białko SS-56 znajduje się głównie w cytoplazmie z silnym okołojądrowym i słabym barwieniem jądrowym. Ponadto nadekspresja SS-56 po transfekcji cDNA do komórek HeLa potwierdziła cytoplazmatyczną lokalizację tego białka. Jednak nasze wyniki nie wykluczają możliwości, że SS-56 może wykazywać silną lokalizację jądrową w innych typach komórek lub w komórkach utrzymywanych w różnych warunkach wzrostu. Laboratoryjne rozpoznanie zaburzeń autoimmunologicznych polega w pewnym stopniu na wykrywaniu autoAb, związanych z pojedynczą chorobą lub grupą chorób. Rutynowa diagnostyka laboratoryjna w SS i SLE obejmuje wykorzystanie immunofluorescencji lub ID do oceny obecności autoAbPs wobec antygenów SSA i SSB (3). Kilka doniesień zasugerowało, że te klasyczne techniki są mniej czułe niż Western blot i ELISA do wykrywania przeciwciał anty-SSA-52 (38 ° 40). Nasze dane potwierdzają te wyniki i pokazują, że wśród 13 SS i 12 pacjentów SLE, którym podano, że nie mają wykrywalnych przeciwciał anty-SSA według ID, sześć (cztery SS i dwa SLE) zostały znalezione przez ELISA do posiadania mierzalnych przeciwciał przeciwko SSA-52. Wśród tych sześciu pacjentów, dwie także przedstawiały wykrywalne przeciwciała przeciwko SSA-60. Z drugiej strony częstość występowania przeciwciał przeciwko SS-56 była dość podwyższona w obu grupach badanych pacjentów. Ponadto, wśród 25 osobników, u których stwierdzono negatywne wyniki dla przeciwciał SSA i SSB, 16 przedstawiało poziomy przeciwciał anty-SS-56 w teście ELISA, które były powyżej punktu odcięcia ustalonego z wartościami uzyskanymi z surowicy zdrowych kontroli. Ponadto wśród ośmiu SS i dziewięciu pacjentów z SLE, którzy byli ujemni w stosunku do SSA (według ID) oraz przeciwko SSA-52 i SSA-60, za pomocą ELISA, odpowiednio stwierdzono cztery (50%) i pięć (56%) dla autoAb. s przeciwko SS-56
[przypisy: królestwo pierożka, centrum tanich podręczników, pompon komis ]
[podobne: centrum tanich podręczników, deli 8, well done kraków ]