Sekwencja PEST w ABCA1 reguluje degradację przez proteazę kalpainy i stabilizację ABCA1 przez apoA-I ad 8

Jednakże działanie laktacystyny było umiarkowane i nie miało związku z degradacją kalpainy za pośrednictwem PEST. Ponadto, ekspresja N-końcowej połowy ABCA1, która nie zawiera sekwencji PEST, również spowodowała ekspresję na powierzchni komórki i ubikwitynację (nie pokazano), co sugeruje, że ubikwitynowane reszty są odległe od sekwencji PEST. Razem nasze badania wskazują, że w normalnych warunkach komórkowych obrót ABCA1 jest szybki, prawdopodobnie odzwierciedlając przede wszystkim degradację bez pośrednictwa kalpainy. Podobnie do naszych ustaleń, Feng i Tabas (37) stwierdzili, że laktacystyna zwiększała ABCA1 w makrofagach obciążonych acetylo-LDL i estrem cholesterolu (37). Jednak działanie laktacystyny stało się bardziej wyraźne w makrofagach obciążonych acetylo-LDL w obecności inhibitora acylotransferazy acylo-CoA: cholesterol, co prowadziło do sugestii, że ścieżka degradacji proteasomalnej jest aktywowana w komórkach z wolnym cholesterolem (37). Razem nasze badania sugerują, że wyraźny szlak degradacji ubikwityny-proteasomu ABCA1 jest aktywowany w makrofagach z wolnym cholesterolem, które to warunki powodują śmierć komórki (38). Zatem, dwa różne szlaki degradacji ABCA1 mogą być aktywne w różnych warunkach komórkowych: podstawowym szlaku degradacji kalpainy, który jest wyłączany przez oddziaływanie z apolipoproteinami i szlakiem ubikwityna-proteasom aktywowanym przez znaczone obciążenie wolnymi cholesterolem. Istnieje precedens dla takiej podwójnej regulacji w odrębnych ścieżkach degradacji proteasomu i kalpainy I. B (24). Co ważne, wykazujemy, że ABCA1 jest zwiększony w hepatocytach i makrofagach in vivo po infuzji apoA-I. Może wydawać się paradoksalne, że wstrzyknięcie apoA-I w ilości stanowiącej około 15% całkowitego apoA-I w osoczu indukuje wzrost makrofagów i wątrobowego ABCA1. Jednak większość apoA-I związana z HDL jest słabym substratem ABCA1 w porównaniu z apoA-I ubogim w lipidy (28). Oczekuje się, że wstrzyknięcie wolnej apoA-I znacznie zwiększy tę drugą pulę w osoczu. Wyniki tych badań in vivo mogą pomóc w wyjaśnieniu przeciwmiażdżycowego wpływu infuzji apoA-I i apoE i pomóc w uzasadnieniu prób infuzji apoA-I u ludzi. Dożylne wstrzyknięcie apoA-I zwiększyło ABCA1 w wątrobie i makrofagach otrzewnowych. Wzrost ilości ABCA1 w makrofagach prawdopodobnie doprowadzi do zwiększenia wypływu cholesterolu makrofagowego i do odwrócenia powstawania komórek piankowatych. Podczas gdy makrofaga ABCA1 nie wnosi znacznego wkładu w poziomy HDL w osoczu (39), stabilizacja ABCA1 w wątrobie prawdopodobnie doprowadzi do zwiększenia poziomów HDL. Zwiększone poziomy HDL mogą promować wypływ cholesterolu makrofagów za pomocą wielu mechanizmów, a także mogą być przeciwmiażdżycowe poprzez działanie przeciwzapalne HDL (9). Nieoczekiwanie, wzrosty w białku ABCA1 nie zostały wykryte u myszy transgenicznych apoA-I; uwypukla to złożoność tych modeli i prawdopodobne istnienie wielu mechanizmów przeciwmiażdżycowych działających poprzez frakcję HDL. Ekspresja ABCA1 jest wysoce regulowana, zarówno na poziomie transkrypcyjnym, jak i potranskrypcyjnym. Interakcja z apoA-I moduluje obie formy regulacji. Zatem wypływ cholesterolu promowany przez ABCA1 prowadzi do zmniejszonej aktywacji LXR / RXR przez oksysteroli i ostatecznie obniża poziomy transkrypcji i białka ABCA1, ale tylko po tym, jak komórki nie są już obciążone cholesterolem. Przeciwnie, niniejsze badanie wskazuje, że apoA-I i apoE mają pozytywny wpływ na ekspresję białka ABCA1 i prawdopodobnie jest to ważne w komórkach piankowatych hepatocytów i makrofagów. Intensywne zainteresowanie skupiło się niedawno na tym, że zwiększający się wypływ cholesterolu makrofagów może stanowić nowe podejście do leczenia miażdżycy (9). LXR / RXR jest ukierunkowany na baterię genów, które pośredniczą w wypływie cholesterolu, transporcie i wydalaniu, a aktywatory LXR są przeciwmiażdżycowe (40). Jednak LXR / RXR również zwiększa transkrypcję SREBP1c i jego docelowych genów, powodując stłuszczenie wątroby i hipertriglicerydemię (41, 42). Nasze wyniki sugerują, że inhibitory proteazy kalpainy (43) lub małe cząsteczki, które modulują miejscową interakcję ABCA1 z proteazą kalpainy na błonie komórkowej, mogą stanowić alternatywny sposób podwyższania poziomu białka ABCA1. Ta strategia jest szczególnie atrakcyjna, ponieważ może naśladować stabilizujący wpływ naturalnych ligandów apoA-I i apoE. Podziękowania Niniejsze badanie zostało wsparte grantem NIH HL-22682. Przypisy Konflikt interesów: Autorzy zadeklarowali brak konfliktu interesów. Zastosowano niestandardowe skróty: transporter kasety wiążącej ATP A1 (ABCA1); receptor wątrobowy X (LXR); retinoidowy receptor X (RXR).
[przypisy: pijalnia wódki i piwa kraków, globulki dopochwowe przeciwzapalne, operacje plastyczne piersi ]
[patrz też: no game kraków, u romana kraków, papryczki 5 ]