Neutrofilowa kinaza białkowa C jako mediator urazu po reperfuzji cd

Pojawienie się mikrokrążenia mózgu było również podobne w obu genotypach (ryc. 3E). Ryc. 3. Anatomia mózgowo-naczyniowa i mózgowy przepływ krwi. (A i B) Przedstawiono reprezentatywne obrazy powierzchni brzusznej (A) i grzbietowej (B) mózgów z PKC. + / + I PKC. . /. myszy perfundowane czarnym tuszem. Punkty zespoleń między MCA i ACA są zakreślone i połączone linią anastomoz w celu zdefiniowania odpowiednich obszarów naczyniowych. (C) Odległości od linii zespoleń do linii środkowej w PKC. + / + (N = 3) i PKC. . /. (n = 3) myszy mierzono na płaszczyznach czołowych 2, 4 i 6 mm od przedniego bieguna. (D) Regionalny mózgowy przepływ krwi przed iw trakcie godziny MCAO i podczas pierwszej godziny reperfuzji w PKC. + / + (N = 3) i PKC. . /. (n = 3) myszy. Względny mózgowy przepływ krwi wyrażono jako procent intensywności sygnału dopplerowskiego niedokrwiennego w porównaniu z drugą półkulą. (E) Mikronaczynienia w korze PKC. + / + I PKC. . /. myszy odkryte przez histochemię NADPH diaphorase. Pasek skali odpowiada 250 & m; PKC. postuluje się udział w chorobie niedokrwiennej mózgu od czasu PKC. mRNA i białko indukuje się w tkance mózgowej szczura otaczającej niedokrwienną zmianę od kilku godzin do dni po przejściowym niedokrwieniu mózgu (17). Jeśli neuronalny PKC. jest odpowiedzialny za różnicę wielkości uderzeń między PKC. WT i myszy zerowe, a następnie PKC. powinien być obfity w regionach mózgu w obrębie terytorium MCA myszy WT, które zostały oszczędzone u myszy N-PKC. W mózgu gryzoni, PKC. jest wyrażany głównie w neuronach we wzgórzu i ich aksonalnych projekcjach w przodomózgowiu, szczególnie w korze nowej, chociaż znacznie niższe poziomy ekspresji występują również w innych obszarach (18). Kilka regionów mózgu, które zostały oszczędzone w myszach PKC-Null (figura 2D) zawiera jednak neurony z małym lub bez PKC. immunoreaktywność u myszy WT (Figura 4, A i B). Niedopasowanie między wzorami niedokrwiennymi a PKC. ekspresja myszy WT doprowadziła nas od badań PKC. i apoptoza w tkankach nerwowych. Zastanawialiśmy się raczej, czy inne tkanki poza mózgiem wyjaśniają różnice w wielkościach udarów myszy WT i myszy P PKC. Rysunek 4 Wzór ekspresji PKC. w mózgu i pozanaczyniowe neutrofile po przejściowym zamknięciu MCA. (A i B) Immunocytochemiczne lokalizacje PKC. w mózgu myszy pokazano w przekrojach wieńcowych przy bregma 0,38 mm (A) i bardziej w odcinku tylnym przy bregma. 1,58 mm (B) dla PKC. + / + (po lewej) i PKC. . /. (po prawej) myszy. (C) Reprezentatywne sekcje z PKC. + / + I PKC. . /. myszy wykazujące zmniejszoną akumulację neutrofili w obrębie martwej tkanki w korze mózgowej PKC. . /. myszy po godzinie MCAO i 24 godzinach reperfuzji. Niebieskie infiltrowane neutrofile zidentyfikowano w kory niedokrwiennej przez barwienie aktywności esterazy za pomocą dichlorooctanu (strzałki). (D i E) Liczba zewnątrzowkórkowych neutrofili w kory niedokrwiennej i prążkowiu PKC. + / + (N = 7) i PKC. . /. myszy (n = 6) po przejściowym MCAO. Nie zaobserwowano barwienia esterazą na odcinkach zwierząt nie poddawanych niedokrwieniu (dane nie pokazane). Paski skali w A i C odpowiadają odpowiednio mm i 25 um. * P <0,05 w porównaniu z kumplami z miotu WT. Osłabiona funkcja neutrofilów u myszy N-PKC. Neutrofile z krwi obwodowej infiltrują do niedokrwiennej tkanki mózgowej podczas reperfuzji i mogą przyczyniać się do uszkodzenia reperfuzyjnego, ponieważ hamowanie adhezji neutrofilów lub zmniejszenie liczby neutrofilów antygenem adhezji anty-neutrofilowej zmniejsza apoptozę po przejściowym niedokrwieniu (4, 19). W celu zbadania, czy naciek neutrofili został zmieniony w myszach pK PKC, zidentyfikowaliśmy neutrofile w przekrojach mózgu przez wybarwianie estrem chlorooctanowym 24 godziny po godzinie przejściowego niedokrwienia. Znaleźliśmy około 80% mniej neutrofili w korze mózgowej i 65% mniej neutrofili w prążkowiu myszy N PKCa w porównaniu do myszy z miotu WT (Figura 4, C. E). Odkrycia te korelowały z badaniami in vitro wykazującymi zmniejszoną adhezję (Figura 5A) i migrację (Figura 5B) neutrofili z myszy nerek PKCa w porównaniu z myszami z miotu WT. Ponadto uwalnianie anionu ponadtlenkowego (O2a) w odpowiedzi na peptyd TNF-a, formyl-Met-Leu-Phe (fMLP) lub ester forbolu (Figura 5C i dane nie przedstawione) i degranulacja mierzona jako uwalnianie laktoferyny w odpowiedzi na fMLP (Figura 5D) lub ester forbolu (dane nie pokazane), były zredukowane w neutrofilach z myszy N PKCa w porównaniu z myszami WT. Pomimo tych różnic w funkcjonowaniu, nie było różnicy w liczbie neutrofili lub innych komórek we krwi obwodowej myszy pK PKC w porównaniu z myszami z miotu WT (Tabela 1) [hasła pokrewne: biustonosz sportowy nike, grudziądz jednostka wojskowa, motochemia ] [hasła pokrewne: trufla kraków, nova krova, pod norenami ]