Geny związane z uczuleniem macicy a 1 (USAG-1), nowy antagonista BMP eksprymowany w nerce, przyspiesza uszkodzenie rurki czesc 4

Najpierw oceniliśmy swoistość neutralizującej aktywności przeciwciała, stosując test pomiaru aktywności fosfatazy alkalicznej i fosforylacji Smad1 / 5/8 w komórkach C2C12 indukowanych przez BMP. Dodanie przeciwciała hamowało aktywność fosfatazy alkalicznej i fosforylację Smad1 / 5/8 indukowaną przez BMP-7, ale nie przez BMP-4 (Figura 5A) ani BMP-2 (dane nie przedstawione), wskazując na specyficzność przeciwciała. Jako kontrolę ujemną użyliśmy dopasowanego izotypowo IgG2B. Następnie podawano neutralizujące przeciwciało przeciwko BMP-7 do USAG1. /. myszy z nefrotoksycznością cisplatyny. Z 7 myszy traktowanych neutralizującym przeciwciałem, 2 myszy zmarły w dniu 2, a mysz zmarła w dniu 3, podczas gdy żadna z myszy traktowanych IgG2B dopasowanym izotypowo nie padła w ciągu pierwszych 3 dni. Podawanie przeciwciała neutralizującego również powodowało pogorszenie czynności nerek mierzone przez podwyższenie poziomu kreatyniny w surowicy do poziomu podobnego do tego u myszy WT, podczas gdy podawanie IgG2B nie powodowało (Figura 5B). Ponadto badanie histopatologiczne nerek w USAG1. /. myszy traktowane neutralizującym przeciwciałem wykazywały ciężko uszkodzone proksymalne kanalikowe komórki nabłonkowe, podczas gdy zmiany te były nieobecne u myszy leczonych IgG2B (Figura 5B). Podajemy również przeciwciało neutralizujące do USAG1 (3 /. myszy z UUO i odkryli, że ekspresja kolagenu typu IV w zatkanej nerce została zwiększona w USAG1. /. myszy traktowane neutralizującym przeciwciałem, ale nie u tych, którym podawano IgG2B (Figura 5C). Histologiczne badanie zatkanych nerek w USAG1. /. myszy leczone neutralizującym przeciwciałem wykazywały silne zwłóknienie śródmiąższowe, podczas gdy zmiana ta była prawie nieobecna u myszy leczonych IgG2B (Figura 5C). Figura 5 Blokowanie aktywności BMP-7 znosi renoprotekcję w USAG1. /. myszy. (A) Ocena neutralizującej aktywności przeciwciała anty-BMP-7. Przeciwciało anty-BMP-7 hamuje aktywność fosfatazy alkalicznej i fosforylację Smad1 / 5/8 indukowaną przez BMP-7, ale nie przez BMP-4. (B) Poziom kreatyniny w surowicy według USAG1. /. myszy leczonych przeciwciałem anty-BMP-7 i reprezentatywnymi objawami histologicznymi w dniu 3 nefrotoksyczności cisplatyny. Pasek skali: 100 .m. (C) Ekspresja genu kolagenu typu IV w nerkach z USAG1. /. myszy leczonych przeciwciałem anty-BMP-7 i reprezentatywnymi objawami histologicznymi w dniu 14 UUO. * P <0,1; ** P <0,01; P <0,001;