Geny związane z uczuleniem macicy a 1 (USAG-1), nowy antagonista BMP eksprymowany w nerce, przyspiesza uszkodzenie rurki cd

Ekspresja E-kadheryny była znacznie zmniejszona w nerkach myszy typu dzikiego, podczas gdy jej ekspresja została zachowana w USAG1. /. myszy (Figura 3C). Ponadto, ekspresja a-SMA, markera miofibroblastów kanalikowo-śródmiąższowych (28), była podwyższona w śródmiąższu zatkanej nerki myszy typu dzikiego, podczas gdy wysoka ekspresja a-SMA była ograniczona do komórek mięśni gładkich naczyń w USAG1. / . myszy (rysunek 3D). Ponieważ ekspansja i zwłóknienie śródmiąższu nerkowego jest kolejną charakterystyczną cechą UUO (6), zbadaliśmy odkładanie kolagenu typu IV, który jest normalnym składnikiem rurowej błony podstawnej. Błony podstawne sąsiednich kanalików sąsiadują ze sobą w normalnej nerce. W zatkanej nerce myszy typu dzikiego ekspansja komponentu śródmiąższowego zwiększała odległość między sąsiednimi błonami podstawnymi, a kolagen typu IV wytwarzany przez śródmiąższowe miofibroblasty był nieprawidłowo wyrażany w śródmiąższu. Jednak w zatkanej nerce z USAG1. /. myszy, odległość między błonami podstawnymi była znacznie mniejsza niż w przypadku myszy typu dzikiego (Figura 3E). Ekspresja kolagenu TNF-a, IL-1 (3, MCP-1, TGF-pi i typu IV była znacząco regulowana w górę w dniu 14 w zatkanej nerce myszy typu dzikiego. Przeciwnie, indukcja tych genów była znacząco osłabiona, odpowiednio o 33%, 46%, 37%, 75% i 23%, w USAG1 (3). myszy (Figura 3F). Ekspresja BMP-7 w zatkanej nerce była porównywalna u myszy typu dzikiego i USAG1. /. myszy. Rysunek 3USAG1. /. myszy wykazywały zmniejszone EMT i zwłóknienie kanalikowo-śródmiąższowe w UUO. (A) Reprezentatywna histologia zatkanej nerki u myszy typu dzikiego i USAG1a /. myszy 14 dni po operacji. Pręty skali: 100 .m. (B) Półilościowa ocena morfologicznego uszkodzenia nerek u myszy typu dzikiego i USAG1a /. myszy, wyrażone jako względne nasilenie w skali od 0 do 4 (n = 6). (C) Ekspresja e-kadheryny w UUO. Lizaty nerki poddano immunoblottingu z przeciwciałem anty-E-kadheryny. Przedstawiono reprezentatywne dane z 4 niezależnych eksperymentów. (D) Immunobarwienie. -SMA w UUO. Groty strzałek wskazują komórki mięśni gładkich naczyń krwionośnych. (E) Immunobarwione kolagenu typu IV w UUO. Paski skali: 10 .m. (F) Ekspresja genu w UUO. Ekspresję genu oznaczono metodą RT-PCR w czasie rzeczywistym. W każdym doświadczeniu poziomy ekspresji znormalizowano do ekspresji GAPDH i wyrażono względem ekspresji u myszy w dniu 0. n = 4. 6 dla każdego eksperymentu. P <0,01;